微量基因組DNA提取試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟
使用微量基因組DNA提取試劑盒前請(qǐng)先在Buffer WB中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。
1. 取1-100μl抗凝血液到1.5ml離心管中。
2. 不足100μl的血液樣本加Buffer ST1補(bǔ)足到100μl。
3. 加入10μl Foregene Protease，渦旋混勻。
4. 加入100μl Buffer ST2，輕輕顛倒混勻，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋及內(nèi)壁的液滴。
5. 將離心管放置于65℃金屬浴或水浴中10min，每間隔3min輕搖混勻一次。
6. 將混合液全部轉(zhuǎn)移至離心柱中，12,000rpm(~13,400×g) 離心1min，棄掉收集管中的廢液。
7. 將離心柱放回收集管中，向離心柱中加入500μl Buffer PW，12,000rpm(~13,400×g)離心1min，棄掉收集管中的廢液。
8. 將離心柱放回收集管中，向離心柱中加入700μl Buffer WB，12,000rpm(~13,400×g)離心1min，棄掉收集管中的廢液。
9. 重復(fù)步驟8一次。
10. 將離心柱放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g) 空管離心1min。
11. 將離心柱轉(zhuǎn)移至新的1.5ml 離心管中，向膜中央懸空滴加15-100μl 已于65℃預(yù)熱的Buffer EB，室溫放置5min，12,000rpm(~13,400×g) 離心1min。